Transient Assay는 최근들어 분자-세포 생물학 연구에 많이 활용되고 있는 실험방법으로, 다양한 식물 조직으로부터 분리된 원형질체를 이용하는 in vivo assay 방법입니다. GFP나 RFP와 같은 다양한 형광단백질 그리고 여러 가지의 tagging system을 활용하여 원하는 유전자의 산물인 단백질을 표지시킴으로써 형광현미경을 통하여 쉽게 추적할 수 있습니다. 일반적으로 형질전환 식물체를 제조하여 연구 결과를 얻기까지는 많은 시간이 소요되지만, Transient Assay를 활용할 경우 1~2주일만에 확실한 연구 결과를 얻을 수 있습니다.
Transient Assay는 다음와 같은 방법으로
진행됩니다.
(1) 원하는 유전자를 GFP나 RFP와 fusion을 위한 Vector 제조.
(2) (1)에서 만들어진 Vector의 Large Prep.
(3) 원하는 식물체로부터 원형질체를 분리하고, Large Prep.된 DNA를 원형질체에 Transformation.
(4) 연구목적에 맞는 다양한 처리
(5) 형광현미경을 통한 분석 및 형광이미지 Capture
(목적에 따라 Western blot. 등의 다양한 실험이 추가됨)
Transient Assay는 다음과 같은 연구에 응용이 가능합니다.
(1) 다양한 Promoter 연구
(2) 외래 유전자의 세포내 발현을 통한 다양한 Function 연구
(3) 외래 유전자의 세포내 발현 유-무 또는 High-expression 연구
(4) 세포내에서의 단백질의 Localization 규명
(5) 기타
Transient Assay는 다양한 연구에 활용이 가능함으로 목적에 따라 추후 협의가 가능합니다.
소요시간: Plant Culture, Vector 제조 및 Prep.(3주), PEG-transformation, 형광이미지
Capture(1주)
Red: Chloroplast
/ Green: GFP
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